의료 실험실의 오염 제어

의료 실험실에서 세포 배양의 오염 위험은 작업이 아무리 세심하더라도 헤아릴 수 없습니다. 위험이 잘못 계산되는 것은 확실히 전례가 없는 일이 아니며 오염은 종종 배양 손실을 초래합니다. 따라서 이 블로그에서는 세포주의 오염을 체계적으로 감지하고 방지하는 방법에 대해 밝히고자 합니다.

모든 의료 실험실은 날마다 위협을 받고 있습니다.
타사에서 구입한 것을 포함하여 세포 배양의 미생물 오염은 실험실에서 드문 일이 아닙니다. 실제로는 그 반대입니다. 실험실에서 배양한 많은 세포주가 마이코플라스마에 감염됩니다. 작은 곰팡이 포자는 어디에나 있으며 공기를 통해 퍼질 수 있습니다. 물론 무균 환경에서 작업할 때는 사람이 실수할 여지가 있습니다. 실수하기 쉽습니다.

세포 배양 실험실의 공포 시나리오 - 모든 유형의 오염:
미생물 오염(박테리아, 마이코플라즈마, 진균, 효모 등)
바이러스 오염
단백질 오염(프리온)
화학적 오염(플라스틱, 중금속 등의 침출물 및 추출물
) 다른 세포 배양과의 오염
오염은 어디에서 오는가?
1. 원래 문화는 얼마나 "깨끗"합니까?

문제는 종종 소스 자료에서 시작됩니다. 배지 생산에 가능한 모든 노력을 기울인다 하더라도 일부 재료는 완전히 무균 상태가 될 수 없습니다. 따라서 마이코플라즈마가 멸균 필터를 빠져나갈 위험이 항상 있습니다. 프리온은 121°C의 증기 멸균에서도 살아남을 수 있습니다.

2. 작업 실험실은 정말 무균 환경입니까?

실험실 오염의 주요 원인 중 하나는 인체입니다. 예를 들어 실험실 기술자가 멸균 작업대에서 여러 생산 라인을 동시에 취급하지 않으면 많은 교차 오염 사례를 피할 수 있습니다. 액체를 적절하게 취급하지 않으면 하나의 문화가 다른 문화를 빠르게 감염시킬 수 있습니다.

또한 일을 서두르는 것은 따분한 일의 최악의 적입니다. 실험실 부화기의 문은 함부로 열어서는 안되며, 물론 장시간 열어두어서도 안됩니다. 아무리 많은 시간적 압박을 받고 있더라도 실험실 기술자는 한 번에 하나의 세포주에서만 작업해야 합니다. 벤치 아래에서 일회용 피펫의 포장을 풀 때 나사를 푼 후 캡을 따로 보관해야 합니다.

3. 올바른 실험실 장비를 사용하고 있습니까?

물론 의료 실험실에서 사용되는 장비도 세포 배양에 오염을 일으킬 수 있습니다. 따라서 다음을 권장합니다.

가소제가 없는 플라스틱 용기를 사용
합니다. 인큐베이터에 적합한 위치를 선택합니다(세면대 근처의 위치는 비누 오염을 유발할 수 있음).
멸균 구리로 만든 인큐베이터 액세서리를 사용하십시오
. 항생제를 사용할 때는 항생제가 없는 라인을 수시로 사육해야 합니다. (항생제가 오염을 가리고 감염이 퍼질 수 있기 때문입니다.)
어떤 감염을 추적하기 위해 어떤 조사 방법을 사용할 수 있습니까?
마이코플라스마 감염에 대한 가장 위험한 것 중 하나는 종종 오랫동안 발견되지 않는다는 것입니다. 원칙적으로 오염 사건은 다양한 방법으로 제어 및 추적할 수 있으며 일부는 매우 정교하고 다른 일부는 그렇지 않습니다.

숙련된 연구실 기술자는 현미경으로만 봐도 교차 오염이 발생했는지 알 수 있습니다.
세포 배양에서 모든 DNA를 추출하면 PCR 방법을 사용하여 마이코플라스마 DNA 함량을 검출할 수 있습니다.
바이러스 형질도입 또는 생물학적 분석을 수행하는 실험실은 바이러스 오염도 확인해야 합니다.
새로운 치료제를 위한 약물을 제조하는 실험실은 박테리아, 포자, 진균, 마이코플라즈마, HIV, HCV 및 BSE의 낮은 위험을 확인해야 합니다.

오염은 어떻게 처리되어야 하는가?
모든 오염 사례를 문서화하고 등급을 매겨야 합니다. 공해 문제를 감추고 있는 의료 연구소는 좋은 평판을 위태롭게 하고 있습니다.

물론, 오염된 경우에도 특별한 청소 조치를 취해야 합니다. 곰팡이 감염의 경우 실험실이 알코올 기반 약제로 정기적으로 소독되는지 확인하는 것이 좋습니다
. 알코올 기반 용액이 있는 과학적 인큐베이터
내부는 오염을 방지하는 데 도움이 됩니다. 월별 열풍 멸균은 많은 실험실에서 표준 의료 관행입니다.
민감한 줄기 세포의 경우 감염된 세포주가 항생제로 치료될 수 있는 경우는 드뭅니다. 대부분의 경우 솔루션은 비용이 많이 듭니다. 문화를 폐기해야 하고 처음부터 작업을 시작해야 합니다
.
오염을 지속적으로 감지, 검증 및 처리할 수 있는 능력은 특히 매우 민감한 줄기 세포를 사용하고 항생제를 사용하지 않는 의료 실험실에서 절대적으로 중요합니다. 투명한 모니터링이 필수적입니다. 오염을 은폐하거나 확산되도록 허용하는 것은 위험을 증가시킬 뿐이며 불필요합니다. 항온 인큐베이터 는 항상 전체 프로세스 단계에서 가장 안전한 구성 요소여야 합니다 . 샘플이 오염된 경우 대부분의 경우 냉각 인큐베이터 배양 의 업스트림 또는 다운스트림에서 발생합니다 .